NobleRyder C9388 BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細胞BL21(DE3)pLysS Competent Cells

產品貨號：C9388

產品名稱：BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細胞BL21(DE3)pLysS Competent Cells

英文名稱：BL21(DE3)pLysS Competent Cells

產品規(guī)格：20*100ul/10*100ul

BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細胞 載體構建

產品簡介：

外觀(性狀)：干冰運輸，單加10kg干冰費

儲存條件：液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月

具體產品的參數(shù)以收到產品說明書的參數(shù)為準

NobleRyder C9388 BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細胞BL21(DE3)pLysS Competent Cells

采用大腸桿菌BL21（DE3）pLysS菌株經特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA的化學轉化。使用pUC19質粒檢測，轉化效率可達107，-70℃保存6個月轉化效率不發(fā)生改變。

基因型：F-,ompT,hsdSB(rB-mB-), dcm, gal(DE3), pLysS, Cmr

特點：該菌株帶有質粒pLysS，因此具有氯霉su抗性。質粒pLysS含有表達T7溶jun酶的基因，能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾目的蛋白的表達。該菌適合表達毒性蛋白和非毒性蛋白。

操作方法：（以下各步驟均為無菌操作）

1、將感受態(tài)細胞置于冰上融化，以下實驗以100ul感受態(tài)細胞為例。

2、向感受態(tài)細胞懸液中加入需轉化的目的DNA，注意目的DNA的體積不要超過感受態(tài)細胞懸液體積的十分之一，輕輕旋轉離心管以混勻內容物，冰浴放置30分鐘。

3、將離心管置于42℃水浴中放置60-90秒，然后快速轉移到冰浴中放置2-3分鐘，不要搖動離心管。

4、向離心管中加入500ul無菌無抗的SOC或LB培養(yǎng)基，37℃150rpm振蕩培養(yǎng)1小時。目的是使質粒上相關的抗性標記基因表達，使菌體復蘇。

5、取適量已轉化的感受態(tài)細胞涂布含相應抗生素的SOC或LB平板，37℃倒置培養(yǎng)12-16小時。涂布用量可根據具體實驗來調整，如轉化的DNA總量較多，可取100ul左右的轉化產物涂板；反之，如轉化的DNA總量較少，可取200-300ul的轉化產物涂板。如果預計的克隆較少，可通過離心后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存，如果次日的轉化菌落數(shù)過少可以將剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事項：

1、實驗過程中應嚴格無菌操作，防止其它DNA或雜菌的污染，避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。

2、感受態(tài)細胞不可反復凍融，否則其轉化效率將會降低。

3、轉化時，轉化效率與外源DNA的濃度在一定范圍內成正比，但當加入的外源DNA量過多或體積過大反而會降低轉化效率。轉化時DNA體積要小于感受態(tài)細胞體積的十分之一。

4、為防止轉化實驗不成功，可以保留部分連接產物，以重新轉化，將損失將到最di。

BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細胞 載體構建 

產品訂購信息：

C9388 BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細胞BL21(DE3)pLysS Competent Cells  20*100ul/10*100ul